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ELISA試劑盒包被的時間與溫度

點擊次數(shù):1825 更新時間:2019-02-22

     說到ELISA試劑盒包被,可能大多朋友們關(guān)注的是包被的時間與溫度。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大提高,因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。

   蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于??蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射,以增加其吸附性能。例如,在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對該抗原的特異抗體作預包被,其后通過抗原抗體反應使抗原固相化。也可用親和素系統(tǒng)作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴大應用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。


   

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