NCI-H358人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞細(xì)胞系
英文名稱(chēng) | NCI-H358 | 規(guī)格 | 1×106cells |
種屬 | 人 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 貨號(hào) | E-XB6241 |
用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 貨期 | 現(xiàn)貨 |
別稱(chēng) H358; H-358; NCIH358
種屬 人類(lèi)
年齡（性別） 男性
組織來(lái)源 細(xì)支氣管及肺泡癌；非小細(xì)胞肺癌；肺；細(xì)支氣管；肺泡
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 NCI-H358細(xì)胞是于1981年從一位開(kāi)始化療之前的患者的腫瘤組織中分離得到的。超微結(jié)構(gòu)研究表明，NCI-H358細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中有Clara細(xì)胞的特征結(jié)構(gòu)，NCI-H358細(xì)胞表達(dá)主要的肺表面結(jié)合蛋白SP-A和RNA，不表達(dá)SP-B和SP-C；NCI-H358細(xì)胞在軟瓊脂中的克隆形成效率為0.83%。 生物安全等級(jí) 1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時(shí)間 ~38-60小時(shí) 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性 Yes, the cells produce tumors in athymic nude mice. 基因表達(dá)情況 lung surfactant associated protein A (SP-A), The cells expressed protein and RNA of SP-A, the major lung surfactant associated protein. 保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-5807 ECACC; 95111733 |
1)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
兔羊膜上皮細(xì)胞 | 大鼠骨髓瘤細(xì)胞Y3-Ag 1.2.3（種屬鑒定） |
人口腔成纖維細(xì)胞 | 人食管癌細(xì)胞TE-12(STR鑒定正確) |
人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞T47D (STR鑒定正確) |
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞 | 人肝癌細(xì)胞SNU-182(STR鑒定正確) |
人鼻腔黏膜上皮細(xì)胞 | 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)M-1（種屬鑒定） |
人喉黏膜上皮細(xì)胞 | 小鼠肺癌細(xì)胞-熒光 lewis+luc（種屬鑒定） |
人眼眶成纖維細(xì)胞 | 人胚胎干細(xì)胞 |
人頰黏膜成纖維細(xì)胞 | 小鼠垂體促甲狀腺濾泡星狀細(xì)胞TtT/GF(種屬鑒定) |
人根尖牙乳頭干細(xì)胞 | 人肝癌細(xì)胞帶綠色熒光 SMMC7721/GFP(STR鑒定正確) |
人結(jié)膜下囊成纖維細(xì)胞 | 大鼠腦I型星形膠質(zhì)細(xì)胞 CTX-TNA2（種屬鑒定） |
人胎盤(pán)微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 小鼠淋ba細(xì)胞白血病L1210(種屬鑒定) |
人羊膜上皮細(xì)胞 | 人結(jié)腸癌細(xì)胞CW-2(STR鑒定正確) |
人胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 | NCI-H358人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞細(xì)胞系人皮膚黑色素瘤細(xì)胞SK-MEL-1(STR鑒定正確) |
人胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞 | 人急性T淋ba細(xì)胞白血病細(xì)胞Jurkat(STR鑒定正確) |
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 人胰腺癌細(xì)胞PANC-1(STR鑒定正確) |
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