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產品名稱:
MEG-01人成巨核細胞白血病細胞細胞系
產品型號:
產品報價:
600
產品特點:
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  MEG-01人成巨核細胞白血病細胞細胞系的詳細資料:

MEG-01人成巨核細胞白血病細胞細胞系

MEG-01人成巨核細胞白血病細胞細胞系

英文名稱

MEG-01

規(guī)格

1×106cells

種屬

生長特性

半貼半懸

細胞形態(tài)

淋巴母細胞樣

貨號

E2038

用途

僅供科研研究實驗

貨期

現(xiàn)貨


MEG-01人成巨核細胞白血病細胞細胞系

MEG-01人成巨核細胞白血病細胞細胞系

別稱 Meg-01; MEG01; Meg01

種屬 人類

年齡(性別) 男性,55歲

組織來源 未知

生長特性 半貼半懸

細胞形態(tài) 淋巴母細胞樣

背景描述 MEG-01細胞源自一位CML患者成巨核細胞轉換期的骨髓細胞。細胞質因子Ⅷ和表面球蛋白Ⅱb/Ⅲa、高碘酸-Schiff(PAS)反應;α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶陽性;髓過氧化物酶、α-丁酸萘酯酶、氯化醋酸AS-D萘苯酯酶和堿性磷酸酶陰性。用單克隆抗體BA-1(抗B細胞、粒性白細胞),HPL-3(抗球蛋白Ⅱb/Ⅲa)和20.3(抗單核細胞、血小板)染色成陽性,其他淋巴和骨髓類抗體成陰性。

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:3

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

 

MEG-01人成巨核細胞白血病細胞細胞系

1)復蘇細胞:將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。

b、根據細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

MEG-01人成巨核細胞白血病細胞細胞系

MEG-01人成巨核細胞白血病細胞細胞系

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否*揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。.觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9. 注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

MEG-01人成巨核細胞白血病細胞細胞系


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產品相關關鍵字: MEG-01 人成巨核細胞白血病細胞
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