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產品名稱:
豬原代主動脈平滑肌原代細胞
產品型號:
產品報價:
2600
產品特點:
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  豬原代主動脈平滑肌原代細胞的詳細資料:

豬原代主動脈平滑肌原代細胞

商品屬性:

豬原代主動脈平滑肌原代細胞

規(guī)格

5x105cells/T25或1mL凍存管

貨號

EY-XY3980

種屬來源

組織來源

主動脈

生長特性

貼壁生長

形態(tài)特征

成纖維細胞樣

形態(tài):成纖維細胞樣
培養(yǎng)基:豬主動脈平滑肌細胞wan全培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

傳代特征:可傳5代左右;3代以內狀態(tài)

 


豬原代主動脈平滑肌原代細胞

細胞基本屬性:

豬原代主動脈平滑肌原代細胞

種屬來源

組織來源:主動脈主動脈

生長特性:貼壁生長

產品規(guī)格5x105cells/T251mL凍存管
換液頻率2-3天換液一次

消化液

產品貨期現(xiàn)貨,1周左右

運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)

供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

背景介紹:主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側第2胸肋關節(jié)高度移行為主動脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈;髂總動脈在骶髂關節(jié)高度分為髂內、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象,探討心血管疾病相關發(fā)病機制是目前研究的熱點;體外培養(yǎng)的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

 


豬原代主動脈平滑肌原代細胞

原代細胞培養(yǎng)的主要步驟包括:

豬原代主動脈平滑肌原代細胞
?一、剝離組織,去除外膜、結締組織等?:將組織從動物體中取出,并去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?:使用生理鹽水或其他適當?shù)木彌_液洗滌組織,然后將其剪成約1mm大小的小塊。

三、?用0.1%~0.2%的消化?:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩沖液中,進行消化。消化時間可根據(jù)具體實驗需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時間短,冷消化時間長但條件更溫和。

?四、吹打分散后,過濾、計數(shù)?:將消化后的細胞吹打到一個離心管中,然后過濾、計數(shù)。

五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?:將計數(shù)后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)操作:

豬原代主動脈平滑肌原代細胞
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)

傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)

傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內狀態(tài)

傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法:

1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4.待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。

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