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產(chǎn)品展示   Products細胞培養(yǎng)>>細胞系專用培養(yǎng)基>>HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基
 
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產(chǎn)品名稱:
HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品報價:
1
產(chǎn)品特點:
HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品:大鼠腎系膜細胞,RRMC細胞兔腹腔主動脈外膜成纖維細胞人髓母細胞瘤細胞;D341Med人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1兔子宮內(nèi)膜干細胞兔支氣管上皮細胞人增生性瘢痕成纖維細胞人前列腺癌細胞;PC-3[PC3]人T淋巴瘤細胞Jurkat亞系;Jurkat77人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2人結(jié)腸腺癌細胞;LS180(CL-187)[LS18
  HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基的詳細資料:

商品描述:

HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品名稱

HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基

規(guī)格

1*125ml/500ml

用途

僅供科研研究實驗

貨號

EY-XP5769

HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HET-1A細胞良好的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含HET-1A細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HET-1A細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

BEGM kit培養(yǎng)基  (Lonza/Clonetics,CC-3170)

備注:培養(yǎng)基包含(A+B)

A: BEBM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基         500ML

B:  細胞生長添加劑            一套(包含下列試劑)

● BPE, 2.0 ml ● Hydrocortisone, 0.5 ml    ● hEGF, 0.5 ml

● Epinephrine, 0.5ml  ● Insulin,0.5 ml      ● Transferrin, 0.5 ml

● Triiodothyronine, 0.5 ml ● Retinoic Acid, 0.5 ml ● GA, 0.5ml

運輸和保存

運輸:        放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法:        基礎(chǔ)培養(yǎng)基2℃~8℃,培養(yǎng)添加劑 -20℃,避光,保存12個月。配置好的wan全培養(yǎng)基2℃~8℃保存1-2個月。

質(zhì)量控制

檢測項目

質(zhì)量控制

澄清度

澄清

PH

7.3±0.2

內(nèi)毒素含量 (EU/mL)

≤10

無菌檢測

細菌

陰性

真菌

陰性

支原體

陰性

細胞生長試驗

細胞形態(tài)

正常

細胞生長實驗

合格



HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基

注意事項:
HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基
僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟:
HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細胞懸浮生長。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基

公司正在出售的產(chǎn)品:
HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基

U-937 人淋巴瘤細胞

L6 細胞專用培養(yǎng)基

人結(jié)腸癌細胞SW620 (STR鑒定正確)

青霉-鏈霉-兩性霉B溶液(0X)

人膀胱移行細胞癌細胞T24(STR鑒定正確)

HEPES(1M)

人間皮瘤細胞NCI-H2452(STR鑒定正確)

非必需氨基酸

人胰腺導管癌細胞CFPAC-1(STR鑒定正確)

丙酮酸鈉(0mM)

小鼠肝癌帶熒光素酶 H22+LUC

L-谷氨酰

人乳腺癌細胞JIMT-1(STR鑒定正確)

L-丙酰胺-L-谷酰胺

人乳腺癌細胞SUM159PT(STR鑒定正確)

氫化的松

小鼠腦神經(jīng)瘤細胞帶熒光素酶Neuro-2a+LUC(種屬鑒定)

嘌呤霉素

人甲狀腺癌細胞ARO(STR鑒定正確)

谷胱甘(還原型)

人食管腺癌 OE-33(STR鑒定正確)

碳酸氫溶液(7.5% )iCell-01300

大鼠肝Kupffer細胞

胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒添加劑

大鼠肝竇內(nèi)皮細胞

雌二醇

人小細胞肺癌細胞NCI-H2286(STR鑒定正確)

轉(zhuǎn)鐵蛋白

人胎盤絨膜癌細胞BeWo(STR鑒定正確)

肌醇

操作要點:

HET-1A 細胞專用培養(yǎng)基
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。



產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: HET-1A 細胞 專用培養(yǎng)基
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MS-5 細胞專用培養(yǎng)基 
 
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